Ki67 при раке молочной железы

Способы проведения исследования

Индекс ki-67 — это особый белок, так сказать антиген злокачественной опухоли, присутствующий в организме человека. Данное вещество формируется исключительно в момент дробления клеток, но если раковые клетки находятся в пассивном состоянии, выявить его невозможно, поэтому он не обнаруживается при обычном гистологическом изучении биоптата. Благодаря такой особенности маркера, медицине под силу спрогнозировать дальнейшее развитие опухолевого процесса.

На сегодняшний день выявление индекса выполняется при диагностировании пациенток, у которых обнаружена карцинома в молочной железе. Однако данный исследовательский метод эффективен не только при раке груди, а и других опухолей в организме человека, однако именно при РМЖ он выполняется чаще, чем в других эпизодах онкологии.

При злокачественной природе опухоли врач рекомендует женщине пройти тестирование для того, чтобы установить влияет ли показатель антигена на формирование опухоли. Помимо этого, назначаются и другие анализы, к примеру, присутствует ли рецептор her2-neu. Исходя из полученных данных, и разрабатывается дальнейшая противоопухолевая терапия. Чем больше клеток занято в синтезе, тем выше уровень онкомаркера.

Показанием для назначения обследования на ки 67 при раке молочной железы является:

  1. Если в организме человека присутствует онкология любой локализации.
  2. Если имеются подозрения на злокачественный характер опухоли.
  3. Если подозревается рост новообразования.
  4. Если необходим тщательный контроль над лечебным процессом.
  5. Если требуется найти процент предполагаемого рецидива онкозаболевания.
  6. Если требуется определиться с врачебной методикой по отношению к болезни.

Параллельно с этим устанавливается гормональная особенность опухолевого образования, и насколько велик риск формирования вторичных очагов в лимфатической системе и других органах.

Вне зависимости от того, насколько чувствительна опухоль к терапии гормональными препаратами и присутствует либо отсутствует поражение лимфатических узлов молочной железы, при большом показателе ki-67 часто наблюдаются рецидивы, которые снижают шансы на выздоровление. Под рецидивными моментами подразумевается:

  • Возврат недуга после лечебного курса.
  • Развитие метастаз в отдаленных внутренних органах (легкие, костный аппарат).
  • Местный рецидив, то есть, непосредственно в тканях и лимфоузлах груди, или в послеоперационном рубце.

Если при рецидивирующем раке показатель маркера существенно возрос, по сравнению с первичным, это указывает на необходимость применения более агрессивных лечебных методов и их комбинацию.

Такой анализ просто незаменим, если есть подозрение на наличие раковых клеток в груди. Обязательно определение количества рецепторов эстрогена и прогестерона. При их повышении активизируется процесс роста злокачественных клеток.

ИГХ-исследование позволяет не только распознать онкологическое заболевание, но и определить его стадию. При помощи исследования врачи выясняют, показана ли гормональная терапия.

Ki67 при раке молочной железы

Опухоли, имеющие большую концентрацию гормонов, чаще всего вполне эффективно лечатся антигормональными препаратами.

Во время проведения анализа обязательно определяют показатель Ki-67, он помогает определить злокачественность процесса. Если иммуногистохимическое исследование молочной железы показывает Ki-67 до 15 %, то исход заболевания считается благоприятным. Если показатель доходит до 30 %, то без химиотерапии не обойтись, потому что опухоль растет довольно быстро. Отметка в 90 % чаще всего свидетельствует о неизбежности летального исхода.

Данный анализ назначается не только при подозрении на онкологию груди, но еще он оказывается довольно информативным, если:

  • Имеется бесплодие.
  • Обнаружены злокачественные образования матки.
  • Наблюдаются патологические изменения в репродуктивной системе.

Такой анализ проводится, если:

  • Часто наблюдаются выкидыши.
  • У женщины было несколько неудачных попыток ЭКО.
  • Диагностирована хроническая форма эндометрита.

Данное исследование помогает выяснить, имеются ли клетки, мешающие зачатию естественным путем.

ИГХ-исследование тканей эндометрия назначается женщинам, у которых уже было несколько неудачных попыток искусственного оплодотворения.

Взятие тканей эндометрия проводится в разные дни цикла, которые назначает врач.

Ki67 при раке молочной железы

Онкологический диагноз всё же редко ставят по результатам единственного исследования.

Гистологический

Второй информативный анализ – гистология. Метод отличается от иммуногистохимии тем, что даёт представление только о клеточном строении. Гистологическим способом выделяют в одном материале несколько различных структур, к примеру, аденокарциномы. Злокачественное образование формируется из железистой ткани, которое выделяет жидкость.

Исходя из типа жидкости, выделяют серозную и слизисто-секреторную. Клетки аденокарцином располагаются фолликулярно или папиллярно. Опухоль бывает твердой или с включениями цист, и уже классифицируется как цистаденокарцинома. Об этих характеристиках узнают по результатам гистологического исследования и корректируют лечение под конкретный тип опухоли.

Технология такая же, как при иммуногистохимии. Берут материал с помощью биопсии, покрывают парафином и разрезают образец на тонкие пластины. Готовые препараты также окрашивают, после чего патоморфолог изучает их под микроскопом.

Недостатки гистологического исследования – длительные сроки ожидания результата планового анализа, 10-14 дней. Срочный анализ делают за 30 мин.

Окрашенный препарат для изучения

Метод МГМ

РМЖ

Ещё один анализ, в основе которого лежит реакция на маркеры – молекулярно-генетический. Помогает установить отклонения в ДНК злокачественной опухоли, влияющие на её метастатическую и инвазивную активность, а также наличие наследственной предрасположенности или спорадической, спонтанной природы образования.

Гистология и иммуногистохимия – два основных метода постановки диагноза при раке, подтверждающие друг друга. Разница в результатах редка, так как иммуногистохимия включает исследование клеточного строения.

Часто после гистологического исследования лимфоузла пациента дополнительно направляют на иммуногистохимию. Под микроскопом материал изучает эксперт, который может что-то упустить. Либо структуру сложно идентифицировать. Метод ИГХ – помощь в спорной ситуации.

Тест Ki-67 не является специфичным для рака молочной железы, он применяется и при других злокачественных заболеваниях. Но львиная доля исследований по определению его значения, как маркера опухоли, приходится на этот рак. Исследователи установили, что высокие уровни Ki-67 указывают на агрессивность опухоли и неблагоприятный прогноз.

Вне зависимости от чувствительности рака к гормональному лечению и наличия или отсутствия поражения регионарных лимфатических узлов, при опухолях с высоким уровнем Ki-67 чаще встречается рецидив, и поэтому они имеют плохой прогноз.

Под термином “рецидив” подразумевается возвращение заболевания после проведенного лечения, появление метастазов в отдаленных органах (легкие, печень, кости) или местного рецидива (возобновление роста раковых клеток а регионарных лимфатических узлах, в тканях молочной железы или в области послеоперационного рубца).

Если уровень Ki-67 стал выше в рецидивирующей опухоли, чем в первичной — это признак, что ее необходимо лечить более “агрессивно”, применять комбинацию противораковой терапии.

Биопсия с иммуногистохимией являются важной частью верификации диагноза при раке молочной железы, предстательной железы, мягких тканей и пр. Особенно актуально исследование для выявления лимфом, поскольку зачастую диагностировать эту болезнь без ИГХ невозможно. Большую роль ИГХ исследование играет в определении гистологического типа недифференцированных опухолевых образований, а также метастазов, которые имеют невыясненный первичный очаг.

Иммуногистохимия рака молочной железы полезна в прогнозировании течения опухолевого процесса и возможности таргентной терапии. Она помогает оценить:

  • функциональное состояние клеток образования;
  • злокачественный потенциал и темп роста опухоли;
  • тенденцию к метастазированию.

ИГХ при онкологических патологиях грудных желез осуществляют, чтобы:

  • установить вид заболевания, восприимчивый к определенной терапии;
  • выявить метастазы, пущенные опухолью, и степень их распространения;
  • найти источник метастазов;
  • установить стадию развития выявленной опухоли;
  • оценить действенность терапии;
  • узнать скорость распространения метастазов;
  • выявить чувствительность кровяных клеток к конкретным лекарственным веществам для отсеивания неэффективных медикаментов.

ИГХ назначается в том случае, когда обычного гистологического исследования недостаточно. Например, когда опухоль молочной железы имеет неспецифичное микроскопическое строение, не позволяющее поставить точный окончательный диагноз.

Перед процедурой пациентка:

  • не должна принимать гормональные лекарства (за неделю до взятия биоматериала);
  • не должна принимать медикаменты для остановки крови;
  • должна провести тщательные гигиенические процедуры.

Исследование проводят в конкретные дни менструального цикла:

  • на 5 – 7 день изучают патологические изменения эндометрия;
  • на 20 – 24 день оценивают секреторную и рецепторную деятельность.

Для проведения иммуногистохимического теста методом биопсии забирают некоторое количество опухолевой ткани грудной железы. Забор осуществляется на участке, где специалист подозревает скопление злокачественных клеток.

Перед процедурой медик отмечает выбранную точку на груди пациентки. Также на анализ могут взять куски опухоли, вырезанные при хирургическом вмешательстве.

Далее диагностическое мероприятие проводится следующим путем:

  1. Собранный биоматериал относят в лабораторию.
  2. Опухолевые образцы опускают в емкость с формалином.
  3. Биоматериал обезжиривают.
  4. Вливают парафиновую жидкость, позволяющую определить структуру и вид опухолевых тканей.
  5. Отрезают кусок опухоли толщиной 1 мм.
  6. Кладут на лабораторное стекло.
  7. В качестве красителей используют химические реагенты и антитела.
  8. Итоги теста готовы спустя две недели.

Показания к тесту при опухоли молочной железы

Ki 67 при раке молочной железы назначается, если имеются такие показания:

  • Было проведено оперативное удаление новообразования – в этом случае есть высокая вероятность рецидива.
  • Высокая агрессивность опухоли. Если клетки новообразования очень быстро делятся, необходимо обязательно проводить процедуру.
  • Состояние пациентки резко ухудшилось на фоне предшествовавшего благополучия. Если появились симптомы, возможно, рак вернулся.
  • Для профилактики рецидивов. Проходить исследования необходимо регулярно по назначению врача, чтобы следить за состоянием пациентки.
  • Наличие доброкачественных новообразований. Регулярное проведение исследования позволяет вовремя обнаружить процесс озлокачествления опухоли.
  • Для подбора наиболее оптимальной схемы терапии и для корректировки уже назначенного лечения. Анализ может показывать, отвечает ли рак на проводимую терапию. Если уровень белка не очень повышен, рассматривается возможность гормонального лечения.
Ki 67
Анализ на Ki 67 показан при раке молочной железы

Также анализ может быть назначен и при других видах рака. Онкология молочных желез не является единственным показанием к проведению процедуры. Также исследование может быть назначено при наличии подозрений о начале злокачественного процесса.

Если врач заподозрил, что рак агрессивен, то он может назначит данный анализ, чтобы убедиться, влияет ли уровень Ki-67 на рост опухоли. Другие тесты также проводятся, например, такие как гормональный рецептурный статус опухоли, наличие рецептора HER2 — Neu, определение возможности метастазирования. Данные результатов этих исследований и пролиферативный индекс Ki-67 (оценочный тест) могут повлиять на выбор плана лечения.

Ki-67 является отличным индикатором нахождения клетки в фазе подготовки к делению и самого деления (стадии пролиферации). Индекс Ki-67 — соотношение Ki-67-позитивных клеток, то есть находящихся в стадии пролиферации, ко всем клеткам опухоли. Этот показатель коррелирует с клиническим течением рака. Наиболее исследована эта взаимосвязь при карциноме простаты, головного мозга и груди.

Другая польза индекса Ki-67 при раке молочной железы — возможность предугадать ответ опухоли на запланированное лечение.

Опухоли груди с высоким процентным содержанием делящихся клеток, соответственно, с высоким уровнем индекса Ki-67, хорошо реагируют на химиотерапевтическое лечение.

Так как препараты, которые используют при этом виде терапии, убивают клетки только в фазе их деления. Поэтому чем выше уровень индекса, тем выше вероятность их эффективности.

Зная показатели индекса Ki-67, врач может определить, какое лечение будет “адекватно работать” в каждой конкретной ситуации.

Рекомендуем прочесть статью о том, как Анджелина Джоли сменила «наследственную матрицу»: семейный рак молочной железы и яичников. Когда встает вопрос о «семейном» или наследственном раке молочной железы и яичников, какие генетические мутации приводят к повышенному риску развития онкологической патологии, а также почему известная актриса не стала рисковать и удалила у себя органы, которые возможно будут поражены, вы сможете очесть в этой статье.

Иммуногистохимическое исследование эндометрия

Во время исследования используются парафиновый белок и предметные стекла. Если во время анализа будет исследоваться частица ткани в растворе формалина, дополнительно должны использоваться особые стекла. Они изготавливаются на заказ, и такая процедура может быть платной. Поэтому прежде чем будет проведена процедура, должно быть закуплено все необходимое оборудование.

Положительный итог гормонального лечения возможен, если маркер Ki-67 при злокачественной опухоли молочной железы не превышает 15 – 17%. Новообразование стремительно растет, если маркер достигает 35%. В этой ситуации незамедлительно осуществляется химиотерапия, позволяющая затормозить размножение злокачественных клеток. Если же маркер выше 85%, то проводить лечение уже поздно, смертельный исход неизбежен.

Непрямой метод считается более информативным и чувствительным. Его суть заключается в поэтапном введении 2 разных антител. Немаркированные первичные антитела вступают в реакцию с опухолевым антигеном в биоптате, образуют комплекс антитело-антиген. Затем вводят вторичные уже маркированные антитела (реагент), которые связываются с определенной частью молекулы первичного антитела. Т. е. первичные антитела являются антигенами для вторичных.

Способы проведения исследования

Иммуногистохимическое исследование проводится в несколько этапов, первым из них является сбор биологического материала. Его получают путем биопсии или изъятия материала во время проведения операции.

Кусочек ткани помещают в формалин и направляют в лабораторию, где его подвергают изменениям:

  1. Материал обезжиривают специальными составами и заливают парафином. В таком состоянии он может храниться практически вечно, поэтому при необходимости исследование можно повторять.
  2. На следующем этапе получают тончайшие срезы — проводят микротомирование. Их размещают на специальных стеклах.
  3. Приготовленные срезы обрабатывают растворами антител определенной концентрации. Использовать для обработки могут составы, содержащие разное количество антител. Какие из них вступят во взаимодействие с раковыми клетками, будет зависеть от разновидности опухоли.

Результаты исследования будут готовы только через одну или две недели.

Иммуногистохимия рака молочной железы проводится путем забора ткани, пораженной онкологией. Биоматериал добывается с помощью биопсии или в процессе оперативного вмешательства. После этого выполняется анализ по следующим этапам:

  • биоматериал помещается в формалин, после чего переправляется в лабораторию для проведения дальнейших манипуляций;
  • специалисты обезжиривают ткань;
  • в материал добавляется специальный жидкий парафин, который помогает выявить структуру клеток опухоли;
  • выполняется микротравмирование – процедура срезания тонкого слоя парафина, толщиной в 1 мм;
  • взятые образцы размещаются на специальных стеклах;
  • выполняется окрашивание материала с помощью реактивов;
  • образцы оставляют на 12 дней, после чего оценивают результат.

Для проведения анализа используют несколько видов маркеров. Если в ходе исследования в биоматериале обнаружена повышенная концентрация эстрогенов и прогестеронов, делают заключение о развитии опухоли. Это также говорит о появлении метастазов от новообразования. Если анализ показал средние результаты, то говорят о слабом росте опухоли. Это говорит о том, что больной после соответствующей терапии имеет все шансы на выздоровление.

Чисто рецепторов HER2 влияют на цветовую гамму реакторов с клетками, которые поражены раком. Чем их больше, тем ярче тон. В этом случае гистология проявляется себя, как неточная наука, поскольку восприятие оттенков образцов субъективное и зависит только от ощущений специалиста, выполняющего анализ.

Определить показатели Ki 67 невозможно во время обычного гистологического исследования. Нужно взять материал для исследования непосредственно в период деления клеток.

Ki 67
Анализ на Ki 67 проводит врач-патоморфолог

Во время анализа исследуется биоптат ткани, меченой антителами, под микроскопом. Предварительно должна проводиться биопсия для взятия образца для процедуры. Также заранее выполняется гистологическое исследование для определения общего состава новообразования и наличия атипичных клеток.

Метод основывается на принципе «антиген-антитело». То есть, атипичная ткань, в которой протекает патологический процесс, экспрессирует антигены. Во время анализа на тканевой образец наносятся антитела. Поэтому такая процедура выполняется по принципу антиген-антитело. За счет этого белок Ki-67 становится хорошо видимым.

Врач-патоморфолог изучает ткани под микроскопом и определяет количество окрашенных маркером клеток. Также специалист определяет точную локализацию атипичных частиц.

Интерпретация результата

Результаты анализа выдаются в форме описания микропрепарата, используемых веществ во время процедуры. Выписывается заключение эксперта, в котором указывается индекс белка Ki67, если реакция на него является положительной.

Ki-67
Интерпретировать результаты Ki 67 должен только опытный врач

Норма Ki67 отличается в зависимости от расположения опухолевого процесса. Поэтому интерпретировать результаты должен только опытный врач. Обычно расшифровку результатов выполняет тот врач, который и направил пациента на проведение процедуры.

Отклонения от нормы и прогноз

Если значения белка находится в пределах нормы (то есть, маркер практически или полностью отсутствует), прогнозы являются благоприятными. Также вариантом нормы являются его значения до 15% – в таком случае у пациентки есть высокие шансы на выживаемость.

Но если его значения сильно отклоняются от нормы, прогнозы заметно ухудшаются. Они зависят от процентного содержания Ki67 в организме больного:

  • Если его значения составляют менее 10%, прогнозы благоприятные. В таком случае наблюдается пятилетняя выживаемость у 95% женщин. Если показатели белка достигают 10-15%, пятилетний рубеж пересекает только 85% больных. В таких случаях может применять гормонотерапия, и она дает хорошие результаты.
  • Когда уровень белка достигает 20%, это говорит о его высокой активности. Но даже в таком случае еще наблюдаются благоприятные прогнозы. Пятилетний рубеж выживаемости проходят 70% пациенток. Большинство больных хорошо отвечают на проводимую гормонотерапию.
  • Если показатели белка составляют около 30%, значит, наблюдается большая скорость роста карциномы. Но в таком случае еще есть шансы на излечение. Гормонотерапия уже почти не помогает, но организм пациентки хорошо отвечает на проводимую химиотерапию.
  • Когда значения Ki 67 находятся в пределах 30-70%, шансы на выживаемость резко уменьшаются. Пятилетний рубеж могут пересечь только 25-30% пациенток. При этом даже проводимая химиотерапия почти не помогает. Однако в таких случаях у больных еще есть шансы на выздоровление.
  • Если уровень белка составляет 80-90% и более, прогноз неблагоприятный. Проводимая терапия не даст никакого эффекта, в таком случае наблюдается очень высокая смертность. Только 5% пациенток могут пересечь рубеж выживаемости в один год. В таких случаях назначается симптоматическая терапия для облегчения состояния пациентки.

Рак груди – это довольно распространенное и опасное заболевание. Нередко оно вызывается резкими гормональными изменениями (половое созревание, беременность, наступление менопаузы и прочие). Поэтому в такие периоды женщины входят в группу особого риска. Им необходимо проходить осмотры у маммолога и гинеколога.

Также для профилактики рекомендуется ежегодно обследоваться у гинеколога до 35 лет. А для женщин старше – не менее 2 раз в год. При появлении тревожных признаков – болезненность груди, появление узелков, изменение цвета сосков и прочих, нужно незамедлительно показаться онкологу. Врач проведет ряд исследований для определения, есть ли какие-то проблемы в организме женщины. Если будет поставлен диагноз «рак», в дальнейшем пациентке придется регулярно сдавать анализ на онкомеркеры.

Ki67 при раке молочной железы является информативным исследованием, которое показывает активность опухоли. Кроме того, проведение анализа на такой онкомаркер позволяет обнаружить наличие в организме злокачественных процессов, ведь белок появляется только во время деления атипичных клеток. Если человек здоров, такого белка в его организме быть не должно.

Особенности выполнения тестирования

Для сдачи анализа на реакцию маркера не требуется особого подготовительного периода и специальной обстановки. Специалист делает забор образца поврежденной ткани и выполняет его окрашивание, тем самым устанавливая численность клеток, готовых к синтезу, или находящихся в цикле размножения.

Для того чтобы расшифровать результат, используется специальный тип реактивов, в которых присутствуют отмеченные определенными веществами антитела:

  • Оценка итогового результата окрашивания выполняется с использованием световых микроскопов.
  • Процентный показатель устанавливается исходя из соотношения окрашенного клеточного материала к остальному, помимо этого степень тональности окрашивания абсолютно никакой роли не играет.
  • При осуществлении тестирования точка отсечки индекса на 15% была установлена исходя из опыта патологоанатомов, при этом учитываются рекомендации известных международных онкологических клиник.
  • Тестирование выполняется с учетом разделения всей раковой опухоли.

Расшифровка теста выполняется в процентном соотношении:

  • Если окрашивание не произошло, то есть, оно нулевое, это означает, что новообразования в организме не имеется. Другими словами, ни одна клетка не достигла стадии пролиферации.
  • Если маркер показал 100%, значит, все клетки находятся в пролиферативной стадии, то есть, они в фазе активного деления. В данной ситуации это указывает на стремительное прогрессирование рака.
  • Показатель ниже 20% говорит о медленном росте опухоли.
  • Если анализ показал больше 20%, это свидетельствует о быстром росте опухоли.

Данный индекс применяется и с целью определения эффективности терапии. Если она прошла удачно, то уровень маркера понижается.

Онкомаркер ки-67 отличается высокой способностью в отношении определения делящихся (пролиферативных) клеток. Установив его степень, можно с точностью спрогнозировать показатель выживаемости.

Если его уровень очень высокий, то есть дробящих клеток достаточно много, значит, раковая опухоль будет хорошо поддаваться лечению химией. Дело в том, что препараты, используемые при химиотерапии, воздействуют только на пролиферативные клетки, а в иной ситуации ее применение не даст должного лечебного эффекта.

Однако у каждого высокоточного анализа имеются индивидуальные минусы, не является исключением и маркер ки 67. С одной стороны, высокий индекс указывает на неутешительный прогноз, но эффективность химиотерапии будет высока. С другой стороны, этот тест может и не пригодится при адъювантной химиотерапии.

Какие молекулы-мишени выявляют во время иммуногистохимии?

Количество возможных мишеней измеряется сотнями. Перед исследованием врач должен понимать, что он ищет, и использовать соответствующие антитела. В онкологии мишенями являются опухолевые маркеры — вещества, которые в здоровых клетках отсутствуют вообще или присутствуют в значительно меньшем количестве. Вот некоторые примеры:

  • Рецепторы к эстрогенам и прогестерону помогают идентифицировать гормонально-позитивный рак молочной железы и разобраться, помогут ли женщине гормональные препараты.
  • Простатспецифический антиген (ПСА) имеет значение в диагностике рака простаты.
  • Альфа-фетопротеин — присутствует в гепатоцеллюлярной карциноме (рак печени).
  • Цитокератины помогают в диагностике рака и некоторых сарком (злокачественных опухолей соединительной ткани).
  • Фермент CD10 (CALLA) связан с карциномой почек, лимфобластным лейкозом.

Если пациенту назначается иммуногистохимия, то этим врач преследует несколько целей:

  • Иммуногистохимия позволяет выявить гистологическую и нозологическую принадлежность опухоли. С помощью этого исследования определяется класс новообразования.
  • С помощью иммуногистохимии определяется локализация первичного очага новообразования. В частности, если месторасположение не установлено, то выявить его можно и по отдельному метастазу.
  • Иммуногистохимия позволяет определиться с тактикой лечения. В частности, этот метод исследования позволяет выявить чувствительность опухолевых клеток к воздействию препаратов таргетной терапии или химиотерапии. С помощью иммуногистохимии врачи определяют резистентность опухоли к некоторым группам химиотерапевтических препаратов. Например, опухоли молочной железы, которые имеют рецепторы к эстрогену лечат немного иначе (в протокол лечения добавляется гормональная терапия). Исследования на протоонкоген her-2-neu позволяют выяснить чувствительность раковой опухоли молочной железы на некоторые противоопухолевые препараты. Если говорить о тесте на маркер пролиферации, то с его помощью определяется степень агрессивности опухоли.

Как проходит процедура

На иммуногистохимический анализ попадает образец ткани, взятый с помощью биопсии. Это способ забора биоматериала с помощью тонкой иглы. Её вводят в тело пациента и шприц-системой втягивают ткань опухоли. Образец проходит подготовку:

  • Фиксация с помощью парафина.
  • Изготовление срезов.
  • Распределение срезов по стеклам.
  • Обработка образцов антителами и красителями.

Перед исследованием биоматериал хранится в формалине. Это позволяет использовать единственный образец долгое время, чтобы не травмировать пациента. Биопсия бывает болезненна, если опухоли расположены в труднодоступных местах. Злокачественные образования в головном мозге по возможности удаляют оперативно, на анализ попадает непосредственно опухоль.

Работа с материалом биопсии

Выявление рака груди

Диагноз: c-r правосторонный . T2N0M0

Иследовано 15 фрагментов ткани молочной железы:

  • 10 из них дукталная карцинома insitu, солидного и криброформного типа, G2 , максимальной протяжёностью 9 мм: выявляются фокусы инвазивного неспецифицированного рака: строма с выраженным склерозом, местами с диффузной лимфоидной инфилтрацией по переферии инвазивного компонента, формированием лимфоидных фолликулов.  

  • 5 фрагментов – ткань молочной железы с аденозом. По данному материалу стадирование онкопроцесса не представляется возможным.

Этот анализ назначают при подозрении на рак молочной железы. ИГХ-исследование в этом случае помогает выявить не только наличие злокачественных клеток, но и чувствительность рецепторов новообразования к гормонам. Ведь нередко рост опухоли молочных желез зависит от уровня эстрогенов и прогестерона. С помощью этого исследования можно также оценить необходимость назначения гормональных лекарств.

Для диагностики рака молочной железы используется специальный набор маркеров. В расшифровке анализа необходимо обратить внимание на концентрацию антигена Ki-67. По этому показателю можно судить о прогнозе заболевания, ведь он указывает на скорость роста опухоли.

Концентрация антигена определяется в процентах. В зависимости от уровня Ki-67 подбирается метод лечения:

  1. Менее 15 %. Прогноз заболевания считается благоприятным. Возможно излечение с помощью гормональной терапии.
  2. От 16 до 30 %. Умеренный рост новообразования. Распространение опухоли можно приостановить с помощью гормонов.
  3. Более 30 %. Такая концентрация антигена свидетельствует о быстром росте раковой опухоли. Необходимо назначение химиотерапии.

Если показатель антигена составляет менее 10%, то в подавляющем большинстве случаев рост опухоли удается остановить с помощью гормонов. Крайне опасной считается концентрация Ki-67 более 90 %. Это указывает на запущенную стадию рака. В таких случаях заболевание чаще всего приводит к летальному исходу.

Расшифровка результатов

Расшифровывая результаты, смотрят на прогестероновые (PR) и эстрогеновые (ER) рецепторы. При ИГХ также определяют количество рецептора человеческого эпидермального фактора роста (белок HER-2) во взятом у пациентки биоматериале. При злокачественной опухоли молочной железы HER-2 повышен.

При повышенном ER и PR в опухолевых тканях можно говорить, что злокачественное образование растет под воздействием гормонов. Если концентрация ER и PR не выходит за пределы нормы или выходит незначительно, то пациентка может надеяться на успешное лечение.

Расшифровывают показатели ИГХ по специальной цветовой шкале, соотнося цвета на шкале с оттенками биоматериала.

  1. 0 и 1. Концентрация белка соответствует норме. Терапевтические мероприятия не нужны.
  2. 2. Концентрация белка средняя. В грудной железе присутствует злокачественная опухоль. Обычно проводят дополнительное исследование, чтобы подтвердить верный результат первого теста. Дополнительное исследование называется FISH, позволяет узнать содержание белка в каждой клетке. Если HER-2 в норме, то FISH-тест даст положительный результат, если повышен, то отрицательный.
  3. 3. Концентрация белка намного выше нормального значения. Однозначно в грудной железе присутствует злокачественное новообразование.

Если тест показал высокую концентрацию белка, то опухоль агрессивного типа, растет интенсивно.

По результатам ИГХ выделяют 4 вида рака груди:

  • А-люминальный – рецепторы ER положительны, рецепторы к белку отрицательны, Ki-67 ниже 14%;
  • Б-люминальный – рецепторы ER и HER-2 отрицательны, Ki-67 выше 15%;
  • сверхэкспрессирующий – рецепторы ER и PR отрицательны, рецепторы к белку положительны;
  • базальноподобный – все рецепторы отрицательны.

Зачем проводят ИГХ?

ИГХ при раке молочной железы проводят с целью:

  • определения вида заболевания для назначения терапии;
  • раскрытия наличие метастаз, идущих от опухоли, и их границы;
  • обнаружения источника метастаз;
  • диагностирования стадии патологии при ее выявлении;
  • оценки эффективности терапии;
  • установления скорости развития метастаз при наличии таковых;
  • выявления чувствительности клеток крови к тем или иным препаратам и методам лечения, чтобы оставить эффективные средства и исключить те медикаменты и способы терапии, которые не влияют на опухоль.

Что означают результаты?

Иммуногистохимия молочной железы — это сложный многоступенчатый анализ, на результат которого влияет множество факторов, например, низкое качество реагентов, недостаточная фиксация исследуемого биологического объекта или неправильно подобранная панель антител. Количество искомых клеток-мишеней исчисляется сотнями, поэтому специалист должен понимать, что он ищет и использовать для этого необходимые антитела.

Гистологи оценивают интенсивность окрашивания опухолевых клеток после взаимодействия с реактивами по специальной шкале:

  • 0-1 — онкологии нет;
  • 2 — онкологическое образование отрицательное;
  • 3 — онкологическое образование положительное.

Длительность ИГХ при раке молочной железы во многом зависит от способа его проведения. Бывает ручной и автоматический. Последний считается более совершенным, поскольку вероятность технической ошибки сведена к минимуму, да и проводится он гораздо быстрее.

Перед определением тактики лечения онколог задается различными вопросами: какова вероятность рецидива заболевания у больного или его смерти, какой результат лечения можно ожидать. Для этого специалист изучает особенности и характеристики опухоли и в зависимости от различных предсказывающих и прогностических факторов назначает тактику лечения.

К этим факторам относятся основополагающие признаки, которые определяют особенность протекания болезни и ее исход. При операбельных формах онкологии груди к таким факторам относятся: морфологическое строение новообразования и его размер, состояние лимфоузлов. Т. е. подобные характеристики определяют хронологию болезни.

Особенности прогностических факторов:

  1. Базируются на биологических характеристиках опухолевого образования.
  2. Взаимосвязаны с продолжительностью жизни пациента в независимости от тактики терапии.
  3. Делят пациентов по степени риска смерти, рецидива.
  4. Примеры: индекс митотической активности, протеолитические ферменты, антиогенез и др.

Индекс митотической активности (MAI) является независимым прогностическим фактором, который характеризует продолжительность жизни больных. У пациентов с индексом меньше 10 в процессе наблюдения летальный исход составлял 6 %, у пациентов с индексом больше 10 — 28 %.

Протеолитические ферменты имеют значение в процессе метастазирования. В трансформированных злокачественных клетках таких ферментов вырабатывается больше, чем в здоровых, поэтому при злокачественных образованиях наблюдается выход этих веществ в межклеточное пространство и увеличение активности. Т. е.

Способность новообразования расти и метастазировать во многом зависит от ангиогенеза — образования новых кровеносных сосудов. В процессе наблюдения пациентов в течение 10 лет, было выявлено, что у женщин с высоким значением плотности микрососудов в опухоли прогноз хуже.

Применение метода в диагностике

Нередко врачи назначают пациенткам ИГХ-исследование при дисплазии шейки матки. Эта патология сопровождается перерождением здоровых клеток в атипические. Такое состояние врачи оценивают как предраковое. Дисплазия 3 степени практически всегда приводит к образованию злокачественной опухоли на шейке матки.

ИГХ помогает оценить риск развития онкологических заболеваний у пациенток с дисплазией. Для исследования используют антитела к белкам p16INK4a и Ki-67.

При анализе определяют не только концентрацию антигенов, но и соотношение между уровнями вышеуказанных белков. Референсные значения показателей исследования индивидуальны и зависят от предполагаемого диагноза. Точно расшифровать результаты теста может только лечащий врач. Высокие показатели концентрации антигенов и соотношения между p16INK4a и Ki-67 указывают на большой риск развития рака шейки матки.

Показания к анализу:

  • Патологии репродуктивной системы, бесплодие;
  • Активный опухолевый рост любой локализации.

Противопоказаний к анализу нет. Порой невозможно получить биоматериал для исследования из-за расположения опухоли.

Иммуногистохимия эндометрия – важное исследование для нахождения причин бесплодия. Его цель – найти антиспермальные клетки, препятствующие оплодотворению. Причиной бесплодия становится нечувствительность эндометрия к гормонам во время овуляции. При этом показатели гормонального фона в норме, антиспермальных тел нет. Иммуногистохимическая диагностика выявляет, что проблема в рецепторах эндометрия.

Трудно поддаются диагностике тимомы. Их деление на злокачественные и доброкачественные условно. Всё зависит от конкретного случая. Статус опухоли вилочковой железы, тимуса показывает исследование на антитела.

ИГХ при раке прямой кишки применяется, чтобы установить эпителиальный или эндокринный характер опухоли, наследственный фактор и прогноз. Методика определяет первичное ли заболевание и метастазы.

Положительные и отрицательные стороны

Преимущества метода:

  • Требуется минимум биоматериала и реактивов;
  • Определяет рак на ранней стадии;
  • Быстрый результат;
  • Точность и достоверность.

Дополнительное преимущество – в возможности трехмерного моделирования. Ответная реакция на антитела видна через три часа. Окончательное заключение дается через 7-10 дней. По истечении этого времени будет точно установлен тип рака и стадия заболевания, а также его первичный очаг. Изменение цвета маркеров обычно не имеет разночтений при постановке диагноза. На итоговом бланке прописывают расшифровку результатов.

Достоверность зависит от метода окрашивания образца реактивами. Это делается автоматически и вручную. При ручном методе не исключён человеческий фактор, ошибки лаборантов. Лечащий врач подскажет, в какую лабораторию обратиться. Пациент может самостоятельно поинтересоваться, как проводится анализ в конкретном учреждении. Для достоверности результата он может проводиться повторно или в двух лабораториях.

Погрешность в результате возникает по вине пациента. Перед биопсией следует отказаться от гормональных препаратов и других лекарств, от физических нагрузок, придерживаться диеты. Внешние факторы влияют на результаты.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Энциклопедия про рак
Adblock detector