Микологические исследования это

1.
ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

1.1. Настоящие
методические указания определяют порядок проведения лабораторного
санитарно-микологического исследования грубых, концентрированных
(зерно, продукты его переработки, дрожжи кормовые, жмыхи, шроты) и
комбинированных кормов, способы отбора и хранения средних проб,
порядок использования некондиционных кормов, а также методы их
обезвреживания.

1.2. Указания не
распространяются на пищевые отходы, премиксы, БВД, травяную муку,
новые кормовые средства, находящиеся в стадии производственной
апробации, или кормовые средства, не имеющие показателей санитарной
оценки.

3.
ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОБ КОРМОВ

2. ИССЛЕДОВАНИЕ кормов
проводится с диагностической целью и направлено на предупреждение
заболеваний, возникающих при скармливании животным кормов,
пораженных токсигенными или патогенными микроскопическими грибами,
а также для выяснения причин отравлений поголовья скота.Исследование включает
органолептический, токсико-биологический, микологический и
физико-химический анализы.

— при
органолептическом исследовании

— 1
суток,

— при
постановке пробы на мышах

— 4
суток,

— при
определении токсичности методом кожной пробы на кролике

— 6
суток,

— при полном
исследовании (органолептическом, микологическом,
токсико-биологическом, физико-химическом)

— 10
суток.

Заключение о результатах
исследований лаборатория выдает не позднее двух суток с момента их
окончания. Срок действия экспертизы — один месяц.

4.1. При обнаружении у
животных признаков микотоксикоза из рационов исключают корма,
подозреваемые в недоброкачественности. Для исследования высылают в
ветеринарную лабораторию пробы всех кормов, входивших в суточный
рацион в течение одного месяца до проявления болезни, и остатки
кормов в кормушках (грубые корма отбирают из пораженных участков
партии).

4.2. Для пересылки и
хранения пробы кормов с повышенной влажностью досушивают при
температуре 40-45° до влажности, предусмотренной соответствующими
ГОСТ.

4.3. Отбор средних проб
кормов проводят в соответствии с действующими Государственными
стандартами: зерна фуражного — по ГОСТ 13586.3-83; комбикорма — ГОСТ 13496.0-80*; муки и отрубей —
ГОСТ 9404-60**; жмыхов, шротов —
ГОСТ 13979.0-68***; кормовых
дрожжей — ГОСТ 20083-74; семян
масличных культур — ГОСТ
10852-64*;

грубых кормов (сено, солома) — ГОСТ 4808-75*; муки кормовой рыбной — ГОСТ 7631-73*; муки кормовой животного происхождения —
ГОСТ 17681-72*. ________________*
На территории Российской Федерации документ не действует. Действует
ГОСТ Р ИСО 6497-2011;** На территории
Российской Федерации документ не действует.

Действуют ГОСТ 9404-88, ГОСТ 20239-74, ГОСТ 26361-84, ГОСТ 27493-87, ГОСТ 27494-87, ГОСТ 27495-87, ГОСТ 27558-87, ГОСТ 27559-87, ГОСТ 27560-87, ГОСТ 27668-88, ГОСТ 27669-88, ГОСТ 27670-88, ГОСТ 27839-88;*** На территории
Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ 13979.0-86;* На территории Российской Федерации документ
не действует.

Действует ГОСТ
10852-86; * На территории Российской Федерации документ
не действует. Действует ГОСТ
4808-87, здесь и далее по тексту;* На территории Российской Федерации документ
не действует. Действует ГОСТ
7631-85; * На территории Российской Федерации документ
не действует. Действует ГОСТ
17681-82.

4.4. Отбор проб проводят
с участием ветеринарных и зоотехнических специалистов и
представителей администрации предприятий, хозяйств, а в конфликтных
случаях — с участием представителя организации-поставщика и местных
органов Госстандарта, в соответствии с «Инструкцией о порядке
приемки продукции производственно-технического назначения и товаров
народного потребления по качеству» (Утверждена Постановлением
Госарбитража при СМ СССР от 25.04.1966
г. N П-7с добавлениями и
изменениями, внесенными Постановлением Госарбитража от 29.12.79 г.
N 81 и 14.11.74 г. N 98).

4.4.1. Отобранную среднюю
пробу разделяют на две части массой не менее 1 кг каждая,
упаковывают в чистые сухие банки или хлопчатобумажные мешки и
опечатывают. Одну часть пробы направляют для исследований с актом
комиссионного отбора и сопроводительным документом, вторую часть
пробы хранят в хозяйстве в течение одного месяца в условиях,
предотвращающих порчу или вторичное загрязнение.

В
сопроводительном документе указывают цель исследования, вид
кормового средства, его назначение, массу партии, место отбора
пробы; для комбикормов, кроме того, — номер и состав рецепта (в
случае отклонения от него прилагают копию качественного
удостоверения), наименование предприятия-изготовителя, дату
выработки продукции, обозначение стандарта на нее, номер смены,
номер партии.

4.4.2. В конфликтных
случаях по требованию представителя-поставщика ему должна быть
дополнительно выделена часть отобранной в хозяйстве пробы.

4.4.3. При
диагностических исследованиях дополнительно указывают дату
возникновения заболевания, вид и количество заболевших животных,
указывают основные клинические признаки заболевания. В случае
падежа животных к сопроводительному документу прилагается копия
акта вскрытия с подробным описанием установленных
патологоанатомических изменений, а также копия экспертиз
ветеринарной лаборатории об исключении инфекционных болезней и
отравлений животных химическими и растительными ядами, если такие
исследования к указанному моменту проведены.

5.
ОРГАНОЛЕПТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

https://www.youtube.com/watch?v=ytcopyrightru

5.1. Органолептический
анализ зерна проводят по ГОСТ
10967-75*; комбикормов — ГОСТ
13496.13-75; сена и соломы — ГОСТ 4808-75; жмыхов и шротов — ГОСТ 13979.4-68; семян масличных культур
— ГОСТ 10854-64**; кормовых
дрожжей — ГОСТ 20083-74. Степень
дефектности зерна определяют в соответствии с «Методическими
указаниями по оперативному учету и отчетности на предприятиях
хлебопродуктов» (утверждены Государственным комитетом заготовок СМ
СССР 9.11.64 г. N 1-18/286).

7.
МИКОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

Микологическое
исследование входит в комплекс санитарно-микологического контроля
кормов и ставит своей целью выявление токсигенных или патогенных
грибов, развивающихся в период вегетации и хранения кормов.

7.1. Выявление
фитопатогенных грибов, развивающихся только в период вегетации
злаков.Санитарно-показательными
фитопатогенными грибами являются спорынья и головневые грибы.Спорынья (Claviceps
purpurea) поражает культурные и дикорастущие злаки в период
вегетации, при этом на зараженных колосьях ко времени созревания
вместо зерен образуются буро-фиолетовые склероции («рожки») длиной
до 15 мм.

При скармливании животным кормов, содержащих такие
склероции (в грубых кормах, зерне) или их частицы (в комбикормах,
продуктах переработки зерна), может возникнуть отравление —
эрготизм.Головня — заболевание
злаковых растений, вызываемое головневыми грибами (Ustilaginales).
В зерновом фураже головня может обнаруживаться как в виде
пораженных зерен (мешочков) или их обломков, так и в виде
распыленных спор (хламидоспор), приставших к оболочке зерна
(«синегузочное» и «мараное» зерно).

7.1.1. Определение
содержания головневых мешочков в зерне.Пораженные зерна
(мешочки) вручную отделяют из навески зерна в 400 г, взвешивают на
технохимических весах с точностью до 0,01 г и определяют их
процентное содержание.

7.1.2. Определение
содержания спор головневых грибов в зерне (ГОСТ 13496.11-74).Сущность метода
заключается в отмывании спор головни от зерна, последующем
осаждении их на бумажном фильтре фильтрованием под вакуумом,
взвешивании и вычислении их процентного содержания.

7.1.2.1. Подготовка
прибора для фильтрации. Фильтрацию проводят с помощью
модифицированного прибора Зейтца (схема прибора приведена в
ГОСТ 13496.11-74).В
нижнюю треть цилиндрической части прибора Зейтца вставляют кольцо,
изготовленное из стальной проволоки диаметром 1-2 мм; на кольцо
помещают металлическую сетку с величиной ячеек 2-4 мм, а на сетку —
два кружка из полотна сита N 0105.

Размер кольца, сетки и кружков
из полотна сита должен соответствовать внутреннему диаметру
цилиндрической части прибора.Кружок, вырезанный из
фильтра «синяя лента», диаметром на 0,3 см, превышающим внешний
диаметр прибора Зейтца, обезжиривают в диэтиловом эфире в течение
20-30 мин и, после высушивания, взвешивают на аналитических весах с
точностью до 0,001 г.

Фильтр помещают в
разъемную часть прибора на резиновую прокладку по размеру внешнего
диаметра прибора, которую предварительно 2-3 часа выдерживают в
эфире. Под резиновую прокладку помещают металлическую сетку,
приложенную к прибору, затем винтами соединяют цилиндрическую и
конусовидную части прибора.

7.1.2.2. Ход определения.
Навеску исследуемого зерна массой 50 г, взвешенную на
технохимических весах, помещают в коническую колбу вместимостью 250
мл, заливают 100 мл диэтилового эфира, взбалтывают в течение одной
минуты, дают отстояться в течение 10-20 секунд для осаждения частиц
почвы, после чего жидкость сливают в прибор Зейтца.

https://www.youtube.com/watch?v=ytpressru

где:
— масса фильтра после фильтрации, г; — масса фильтра до фильтрации, г.Допускаемые расхождения
между результатами контрольных испытаний не должны превышать
0,01%.

7.1.3. Определение
содержания спор головневых грибов в комбикормах и продуктах
переработки зерна (ГОСТ
13496.10-74).Сущность метода
заключается в подсчете количества спор головневых грибов с помощью
счетной камеры Горяева.

7.1.3.1. Подготовка к
испытанию. Средний образец комбикорма массой 1 кг размалывают на
лабораторной мельнице до прохождения через сито с диаметром
отверстий 1 мм. Указанного измельчения достигают просеиванием и
дополнительным измельчением остатка комбикорма на сите до тех пор,
пока вся взятая масса комбикорма не будет измельчена до указанной
степени размола.

После измельчения образец тщательно перемешивают.
После этого 10 г измельченного корма помещают в фарфоровую ступку и
высушивают в сушильном шкафу при 100 °С в течение 15 мин, после
чего навеску тщательно растирают в фарфоровой ступке, периодически
(3-5 раз) добавляя по 3 мл диэтилового эфира для равномерного
распределения спор.

Микологические исследования это

Для установления
равномерности распределения спор гриба в навеске готовят препарат
для микроскопирования. С этой целью в каплю воды на предметное
стекло с помощью препаровальной иглы, смоченной в воде, помещают
небольшое количество корма, растертого в диэтиловом эфире,
накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом.

В
хорошо растертой навеске не должно содержаться склеенных в кучки
спор. На одном стекле готовят одновременно два препарата.0,1 г комбикорма,
растертого в эфире, помещают в пробирку, приливают 10 мл 0,5%-ного
раствора едкого кали, взбалтывают, нагревают над пламенем горелки
до кипения и охлаждают.

7.1.3.2. Ход определения.
После тщательного перемешивания тонко оттянутой пастеровской
пипеткой сразу же берут небольшое количество содержимого пробирки и
вносят его в счетную камеру Горяева.Просмотр и подсчет спор
производят с помощью микроскопа при хорошем освещении и увеличении
200-300. Считают количество спор на всей сетке
камеры, площадь которой равна 9 мм.

При наличии половинок спор каждые две
половинки считают за одну целую спору.Споры грибов хорошо
различимы под микроскопом, одноклеточные, шаровидные, но могут быть
продолговатыми, эллиптическими или неправильной формы. Цвет спор —
желтоватый, коричневатый, оливковый. Оболочка гладкая либо
бородавчатая, щетинистая, сетчато-утолщенная (чертеж спор
головневых грибов приведен в ГОСТ
13496.10-74).

где:
— среднее арифметическое найденного числа
спор; — количество спор головневых грибов,
установленное опытным путем для корма, содержащего 0,1%
головни.Допускаемое расхождение
между результатами контрольных испытаний не должно превышать
0,01%.

7.1.4. Определение
содержания спорыньи в зерне.Из навески зерна 400 г
отбирают вручную все «рожки» как целые, так и их частицы,
взвешивают на технохимических весах с точностью до 0,01 г и
определяют процентное содержание.

7.1.5. Определение
содержания спорыньи в комбикормах и продуктах переработки зерна
проводят по ГОСТ 13496.5-70.Сущность метода
заключается в отделении частиц склероциев спорыньи от массы корма
путем обработки навески корма хлороформом, этиловым спиртом и 3 н
раствором едкого натра или едкого кали.

7.1.5.1. Подготовка к
испытанию. Средний образец комбикорма весом 1 кг размалывают на
лабораторной мельнице до прохождения через сито с диаметром
отверстий 1 мм, тщательно перемешивают и разравнивают тонким слоем,
из нескольких точек которого (не менее 5) берут навески по 1 г.

3
н раствор едкого натра готовят путем растворения 120 г его в 1 л
дистиллированной воды; для приготовления 3 н раствора едкого кали
растворяют 168,33 г его в 1 л дистиллированной воды.

7.1.5.2. Проведение
испытания. 1 г измельченного комбикорма помещают в стеклянную
бюксу, приливают 10 мл хлороформа и взбалтывают, затем при
постоянном встряхивании добавляют небольшими порциями 5 мл
этилового спирта. Темные частицы спорыньи вместе с небольшим
количеством частиц комбикорма всплывают на поверхность, остальная
масса комбикорма оседает на дно.

Затем осторожно, не допуская
смешивания слоев, по стенке бюксы доливают 3 н раствор едкого натра
или едкого кали с таким расчетом, чтобы он покрыл всю поверхность
жидкости слоем не более 3 мм.При ярком освещении в
желтоватом слое щелочи хорошо различимы красновато-фиолетовые
частицы наружных слоев и серовато-сиреневые частицы внутренних
слоев склероциев спорыньи. Просмотр и подсчет частиц спорыньи
проводится с помощью лупы.

7.1.5.3. Подсчет
результатов испытания. За окончательный результат принимают среднее
арифметическое пяти параллельных определений. Содержание спорыньи в
корме определяют по таблице.

Среднее
арифметическое количество всплывших частиц спорыньи

Содержание
спорыньи, %

Не более
1,0

0,05

От 1,1 до
2,0

0,1

От 2,1 до
4,0

0,25

https://www.youtube.com/watch?v=ytcreatorsru

7.1.6. Оценку качества
корма, содержащего головневые грибы и спорынью, проводят в
соответствии с действующими Государственными стандартами на сырье и
комбикорма.

7.2. Выявление грибов,
способных развиваться в период хранения корма.Особую опасность для
животноводства представляют грибы, способные развиваться в
хранящейся массе корма. К ним относятся продуценты большинства
известных в настоящее время микотоксинов, таких как афлатоксины,
зеараленон, Т-2 токсин, а также грибы — возбудители
аспергиллеза.

7.2.1. Первичное
выделение грибов из кормов.Первичное выделение
грибов из кормов проводят путем посева их на питательную среду в
чашки Петри — на агар Чапека или сусловый агар, а также (грубые
корма) во влажные камеры со средой Ван-Итерсона (Приложение 7).Для предупреждения
загрязнения посевов применяемая посуда (чашки Петри, пипетки и др.

)
и инструменты должны быть стерильными. Стерилизацию чашек,
завернутых предварительно в бумагу, а также пипеток проводят в
сушильном шкафу при температуре 140-160° в течение 2 часов.Все процессы, связанные с
разливкой питательных сред в чашки Петри, подготовкой корма для
посева, с посевом корма, проводят в стерильных условиях — около
пламени горелки в специальном боксе.

Перед посевом проводят
контроль зараженности воздуха в боксе спорами грибов
седиментационным методом, для чего 1-2 чашки со средами оставляют
открытыми в течение 3 мин.Стерилизацию бокса,
рабочего помещения, термостата, холодильника проводят парами
формальдегида с последующей нейтрализацией аммиаком.

На 1
м объема помещения расходуют 45 мл 40%-ного
формальдегида, к которому добавляют 20 мл воды и 30 г
марганцевокислого калия. Дезинфекцию проводят в течение 2 часов,
после чего для нейтрализации паров формалина применяют нашатырный
спирт из расчета 50% от объема затраченного формалина.Перед посевом питательный
агар расплавляют в водяной бане, затем после охлаждения до 45-50°
для подавления сопутствующей бактериальной флоры добавляют
антибиотики (пенициллина — 50000 ед.

https://www.youtube.com/watch?v=upload

и стрептомицина — 100000 ед.
на 1 л среды).Приготовленный агар в
жидком виде разливают в стерильные чашки Петри и дают застыть на
горизонтальной поверхности. Слой агара должен быть не менее 0,5
см.Для приготовления влажной
камеры на дно чашки Петри помещают тонкий слой ваты, на нее —
кружок фильтровальной бумаги по диаметру чашки (вместо ваты можно
положить несколько кружков фильтровальной бумаги), после чего
стерилизуют в сушильном шкафу.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Энциклопедия про рак
Adblock detector